توضیحات
عنوان فارسی: بیان پروتئین نوترکیب با توان عملیاتی بالا در E.coli : وضعیت فعلی و چشم انداز
عنوان انگلیسی مقاله ترجمه شده:
High-throughput recombinant protein expression in Escherichia coli: current status and future perspectives
بیان پروتئین نوترکیب با توان عملیاتی بالا در E.coli : وضعیت فعلی و چشم انداز
خلاصه
سهولت دستکاری ژنتیکی،هزینه کم ، رشد سریع و مطالعات قبلی،Escherichia را به یکی از پرکاربردترین گونه های میکرو-ارگانیزم برای تولید پروتئین های نو ترکیب تبدیل کردند.در این دوران پس از ژنومی، چالش بیان سریع و پاک کردن تعداد زیادی از پروتئین ها برای مقاصد دانشگاهی و تجاری با روش توان عملیاتی بالا، هنوز پا برجاست.
در این بررسی، ما چند حالت از رویکرد فنی که برای شبیه سازی، بیان و تصفیه، عملکرد موازی ملکولهای مختلف مناسب می باشند را مطرح کرده و همچنین پیشرفتهای اخیر مربوط به بیان پروتئین های محلول، m RNA های تابیده، تگ های همجوشی، تغییرات پس از انتقال و تولید پروتئین های غشایی را بیان کردیم.ما به تلاشهای مداوم برای غلبه بر چالشهای مختلف در بیان پروتئین های E.coli اشاره کردیم.که می تواند به بهبود سیستم فعلی آزمون و خطا با یک طراحی قابل پیش بینی و منطقی، منجر شود.
1.مقدمه
مطالعات ” توان عملیاتی بالا ” ، تحقیقی است که اجازه می دهد تا هزاران اندازه گیری همزمان ملکولهای بیولوژیکی انجام شود و در نتیجه وجود تکرارهای زیاد را ممکن می سازد. این تکنولوژی در اوایل سال 1990 ایجاد شد.زمانیکه اولین رشته های DNA خودکار توسعه داده شده و توالی ژنوم انسانی آغاز شد.
در دوران پس از ژنومی، استفاده از تکنیک ” توان عملیاتی بالا ” به صورت چشمگیری از نظر سنجش RNA ، DNA ، پروتئین ها، چربی و متابولیت، افزایش یافته است.
و این تکنیک ها با موفقیت برای پاسخ به سؤالات مختلف بیولوژیکی مرتبط با زیست شناسی سرطان ، محیط زیست، زیست شناسی سلولی و سیستمهای زیست شناسی، بکار برده شدند. بیان پروتئین و خالص سازی ، نقش محوری در بیوشیمی بازی می کنند پروتئین های نو ترکیب را می توان با استفاده از سیستم پرو کاریوتیک ) Escherichia coli و Bacillus Subtilis) سیستم های یوکاریوتی (مخمر، سلولهای حشرات و سلولهای پستانداران) و یا با سیستم های آزمایشگاهی توصیف کرد.
سیستم E.coli انتخاب اول غربالگری اولیه برای بیان پروتئین های نو ترکیب است. زیرا این سلولها می توانند به آسانی دستکاری شده، بصورت ارزان کشت شوند و به سرعت رشد کنند.در سالهای اخیر، بسیاری از گونه های جدید، بردارها و بر چسب ها برای غلبه بر محدودیت های این سیستم، توسعه داده شده اند، که شامل کدون، تشکیل اندام داخلی، سمی بودن، عدم فعالیت پروتئین، بی ثباتیm RNA و عدم تغییرات پس از انتقال، می شود.سیستم بیان E.coli ، به طور گسترده مورد بررسی قرار گرفت ولی بیان پروتئین و خالص سازی با استفاده از این سیستم کاری بسیار پر زحمت و وقت گیر است. بنابراین باید یک رویکرد موازی با توان عملیاتی بالا، در بیان پروتئین و عمل خالص سازی ، مورد استفاده قرار گیرد.که تنگه ای در مطالعات عملکرد پروتئین و ساختار و کاربرد آن در دوران پس از ژنومی ، به حساب می آید.
متد های ” توان عملیاتی بالا ” در تولید پروتئین ها در آغاز این قرن بیان شده و تکنیک ها به طور گسترده در دسترس قرار گرفتند و پروتئین های نو ترکیب در تشکیل اندام های داخلی با یک رویکرد موازی، نمایان شده و پالایش شدند.
ما همچنین سیستم های شخصی خود را توسعه دادیم که بصورت موازی پروتئین ها را از آرکیا ها ، توصیه می کرد.پیشرفتهای متعددی در این روشها در طول چند سال گذشته ایجاد شده است در این بررسی، ما در مورد معایب و مزایای به ویژه متد جاری بحث خواهیم کرد. متد هایی که هدف آنها شبیه سازی ژنی، ساخت و ساز بردار، پلاک های آمیزشی و گونه های میزبان ،می باشد.
توجه:
- برای دانلود فایل word کامل ترجمه از گزینه افزودن به سبد خرید بالا استفاده فرمایید.
- لینک دانلود فایل بلافاصله پس از خرید بصورت اتوماتیک برای شما ایمیل می گردد.
به منظور سفارش ترجمه تخصصی مقالات خود بر روی کلید زیر کلیک نمایید.
سفارش ترجمه مقاله
دیدگاهها
هیچ دیدگاهی برای این محصول نوشته نشده است.