توضیحات
عنوان فارسی: فلور متری ولتاژکلمپ:ادغام روش های فلورسانس و الکترو فیزیولوژی جهت بررسی ساختار نقش Na+/Ky-Atpase
عنوان انگلیسی مقاله:
Voltage clamp fluorometry: Combining fluorescence and electrophysiological methods to examine the structure–function of the Na+/K+-ATPase
چکیده
در این مقاله کارهای اخیر بر روی تنظیمات پویایی و ساختاری Na+/Ky-Atpase با استفاده از فلور متری ولتاژکلمپ واحد فرعی مثل ساختارهای بیو شیمیایی،بیو فیزیکی،وساختاری از لابراتوارها خلاصه شد. تحقیق ما بر ادغام بر چسب گذاری فلورو فور خاص بر روی واحد فرعی آلفا ،بقا یا گاما با بررسی های الکترو فیزیولوژی در مورد واکنش های جزئی پمپ زنی یونی تاکید دارد. تا تغییرات را در شدت فلورسانس همراه با پالس های ولتاژ و مبادله محلول را نشان دهند. ما بر حسب پیامد های این بررسی های باقی ماندهواحد جزء بتا را تعیین کردیم که به دنبال برچسب گذاری با تترامیتل رودامین -6- مالیمیر به عنوان یک
گروه پذیرنه جهت نشان دادن حالت مواجهه ای هولو آنزیمر ،عمل می کند.بعلاوه ما قادر به تعیین محدودیتهاییفاصله بین آلفا،بتاو گاما جهت بررسی جنبش های اجتماعی این محدودیتها در طی انتقال یونی هستیم . اما پیشرفت های چشمگیری در زمینه آگاهی از مکانیزیم ملکولی Na+/Ky-Atpase انجام شد. بنابراین این تحقیق با نتایج بدست آمده از گروههای دیگر ومسیرها ی تجربی آینده مقایسه شد.
مقدمه
Na+/Ky-Atpase برای اولین بار در سال 1957 شناسایی شد وجنیز سکو جایزه صلح نوبل سال 1997 را در این زمینه برد .چرخه واکنش Na+/Ky-Atpase با طرح آلبرز-پست توصیف شد. در این طرح آنزیم، در 2 مواجهه اصلی E2وe1 قرار دارد که در آن سه یون nat آغازدر e1 در سمت سیتوپلاسمی برای انتقال در بخشهای پلاسمایی و 2یون kt دارای پیوند با مکان خارج از سلولی پیوند دارد .
واکنش کلی ،الکتروژنی است زیرا جنبش شبکه ای بارها یعنی سه یون nat برای 2 یون kt وجود دارد. بعلاوه مهمترین وقایع یا رویدادهای الکتروژنی مراحل انتشار را پیوند مجدد خارج از سلولی است که با بار مقابل e2pوe1p با انرژی متصل است . پمپ یونی که در غشای پلاسمایی بیشتر سلولهای یوکاریوتی نشان داده شده متشکل از 2 زیر واحد اجباری آلفاوبتا یعنی یک عضو از خانواده fxyo پروتئین های مورد نیاز برای عمل هستند . این آنزیم عضوی از خانواده atpaseنوع p است و به این دلیل به این نام خوانده شده که هر عضوی از این خانواده در باقی مانده های آسپارات در توالی dktgtlt در هیدرولیز atp فسقریل شده است . واحد فرعی آلفا متشکل از تقریبا” 1000 آرمینو اسید وحاوی پیوند هایی لیگاند(KTوNAT) زیر لایه ( ATP) و بازدارنده است .این واحد ها 10 حوزه غشای انتقالی و سه حوزه سپتوسلی ،بزرگ از قبیل حوزه فعال کننده (A که به عنوان فعال کننده دروازه های تنظیم کننده پیوند وانتشار کاتیونهای منتقل شده و حوزه فسفزیل سازی (p) دارند که شامل باقی مانده های فسفریل شده است .
هر کدام از این نواحی در چرخه کاتالیزی دستخوش تغییرات عمده ای می شوند که با یک سری ساختارهای کریستالی CA2T-ATDدر حالتهایی تطبیقی تشریح می شود . این تغییر تطبیقی در طی انتقال یونی به بخش انتقال غشایی منتقل شده و حلقه M5-M6 در سنجش کارکردی در طی چرخه پمپ زنی دخیل است . در نهایت باید عنوان کرد که 4 ایزوفرم واحد فرعی آلفا رانسانها وجود دارد . ایزوفرم A1 در کل یه و شش A2 یک ایزو فرم غالب در ماهیچه اسکلتی است. ایزوفرم سوم در مغزو قلب ایزوفرم A4 در حرکت اسپرم وجود دارد.
به علاوه واحد فرعی آلفا ،زیر واحد بتا نیز باید کار کند .این پروتئین تقریبا” 300آمفیو اسید طولانی داشته وحاوی مکانهای گلیکوزل سازی متعدد مثل پیوندهای دی سولفیدی است که نسبت به کاهش مقاوم هستند . این زیر واحد بتا به تراکم مناسب هولو آنزیم به غشای پلاسما نیاز دارد.
پس از نمایش متنوع یک زیر واحد آلفا ،این پروتئین در اندام های زیر سلولی متمرکز و تجزیه شد .این زیر واحد بتا را کاتیون متصل مجاور می دانند. سه ایزوفرم از واحد فرعی بتا وجود دارد که به صورت متفاوت در بافتها نشان داده شده و تفاوتهای متوالی جزئی بین ایزوفرم ها در نتیجه تفاوتهای کارکردی ایجاد شد . در مقایسه با واحد های آلفاو بتا ،خانواده FXYD پروتئین های نیازمند عملکرد نیست . 7غضو پروتئین های-XYD2
پستانداران وجود دارد که کمتر از 100باقی مانده داشته و مجاورت مشهود برای سدیم ،پتاسیم یا ATP را تعدیل می کند.
توجه:
- برای دانلود فایل word کامل ترجمه لطفا اقدام به خرید فرمایید.
- پس از خرید بلافاصله لینک دانلود فایل برای شما ایمیل خواهد شد.
دیدگاهها
هیچ دیدگاهی برای این محصول نوشته نشده است.